在食品衛(wèi)生檢驗(yàn)中,《GB4789.2 食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) 食品微生物學(xué)檢驗(yàn) 菌落總數(shù)測(cè)定》是一個(gè)非常重要的標(biāo)準(zhǔn),很多種類的食品檢驗(yàn)中,菌落總數(shù)定為必檢項(xiàng)目。此外,該標(biāo)準(zhǔn)還用于加工環(huán)境、原材料和過(guò)程中間產(chǎn)品的衛(wèi)生監(jiān)控中。
該標(biāo)準(zhǔn)目前使用的版本為GB4789.2-2016版,新版標(biāo)準(zhǔn)于2022.06.30發(fā)布,自2022.12.30實(shí)施。本文就新舊版本的差異專門列表比較(如表1),以期為廣大檢驗(yàn)工作人員提供參考。
表1 新舊版本標(biāo)準(zhǔn)差異對(duì)比表
比較項(xiàng)目 | 2016版 | 2022版 |
設(shè)備和材料 | 恒溫水浴箱:46℃±1℃ | 恒溫裝置:48℃±2℃ |
培養(yǎng)基和試劑 | / | 增加:菌落總數(shù)測(cè)試片 |
檢驗(yàn)程序 | ||
操作步驟 | 6.1.3用1mL無(wú)菌吸管或微量移液器吸取1:10樣品勻液1mL,沿管壁緩慢注于盛有9mL稀釋液的無(wú)菌試管中(注意吸管或吸頭尖-端不要觸及稀釋液面),振搖試管或換用1支無(wú)菌吸管反復(fù)吹打使其混合均勻,制成1∶100的樣品勻液 | 6.1.3用1mL無(wú)菌吸管或微量移液器吸取1:10樣品勻液1mL,沿管壁緩慢注于盛有9mL稀釋液的無(wú)菌試管中(注意吸管或吸頭尖-端不要觸及稀釋液面),在振蕩器上振蕩混勻,制成1∶100的樣品勻液。 |
6.1.6及時(shí)將15mL~20mL冷卻至46℃的平板計(jì)數(shù)瓊脂培養(yǎng)基(可放置于46℃±1℃恒溫水浴箱中保溫)傾注平皿,并轉(zhuǎn)動(dòng)平皿使其混合均勻。 | 6.1.6及時(shí)將15mL~20mL冷卻至46℃~50℃的平板計(jì)數(shù)瓊脂培養(yǎng)基(可放置于48℃±2℃恒溫 裝置中保溫)傾注培養(yǎng)皿,并轉(zhuǎn)動(dòng)培養(yǎng)皿使其混合均勻。 | |
結(jié)果與報(bào)告 | 7.2.3若所有平板上為蔓延菌落而無(wú)法計(jì)數(shù),則報(bào)告菌落蔓延。 | 刪除了“菌落蔓延"的報(bào)告形式。 |
附錄A | A.2 磷酸鹽緩沖液 | A.2 無(wú)菌磷酸鹽緩沖液 |
附錄B | 無(wú) | 新增具體示例 |
通過(guò)上表可以看出,對(duì)于檢驗(yàn)操作人員而言,新版標(biāo)準(zhǔn)最大的改變有三點(diǎn):
1、稀釋度的選擇
舊版標(biāo)準(zhǔn)中規(guī)定,選“2-3個(gè)適宜稀釋度的樣品勻液"進(jìn)行傾注;新標(biāo)準(zhǔn)中則為選“1-3個(gè)適宜稀釋度的樣品勻液"進(jìn)行傾注。新標(biāo)準(zhǔn)這樣規(guī)定,表面看來(lái)是更寬松了,可以允許檢驗(yàn)者選擇1個(gè)稀釋度進(jìn)行計(jì)數(shù),但筆者認(rèn)為,這一規(guī)定實(shí)際上對(duì)檢驗(yàn)人員的要求更高了。選擇計(jì)數(shù)的稀釋度較多較廣,比方說(shuō)每個(gè)稀釋度都進(jìn)行計(jì)數(shù),那么得出的每個(gè)稀釋度數(shù)據(jù)之間可以相互對(duì)比一下,對(duì)檢測(cè)結(jié)果有個(gè)權(quán)衡,如果只選擇一個(gè)稀釋度進(jìn)行計(jì)數(shù),必然要求檢驗(yàn)人員對(duì)自己的樣品非常了解,比如說(shuō)有的樣品中含菌量很少(少于300CFU/mL),只選最di稀釋度進(jìn)行計(jì)數(shù)即可,但如果含菌量較高的樣品,只選一個(gè)稀釋度進(jìn)行計(jì)數(shù),沒(méi)有第二個(gè)稀釋度數(shù)據(jù)作為參考,那么得出的檢驗(yàn)結(jié)果很可能是有缺陷的,這種情況下,建議還是盡量多做選幾個(gè)稀釋度來(lái)計(jì)數(shù)。
總之,雖然新版標(biāo)準(zhǔn)允許選用1個(gè)稀釋度來(lái)計(jì)數(shù),但考慮檢驗(yàn)工作的嚴(yán)謹(jǐn)性,我們還是建議盡量多選幾個(gè)稀釋度來(lái)計(jì)數(shù),以期得出最真實(shí)的檢驗(yàn)結(jié)果。
2、培養(yǎng)基的溫度
舊版標(biāo)準(zhǔn)中,指定用“恒溫水浴箱",新版標(biāo)準(zhǔn)改成了“恒溫裝置",這種表述更加寬泛,筆者理解為只要能達(dá)到“恒溫"的目的就行,不拘泥于水浴箱或其它保溫恒溫裝置。關(guān)鍵是培養(yǎng)基的溫度,舊版為“及時(shí)將15mL~20mL冷卻至46℃的平板計(jì)數(shù)瓊脂培養(yǎng)基(可放置于46℃±1℃恒溫水浴箱中保溫)傾注平皿,并轉(zhuǎn)動(dòng)平皿使其混合均勻",而新版標(biāo)準(zhǔn)則改為“及時(shí)將15mL~20mL冷卻至46℃~50℃的平板計(jì)數(shù)瓊脂培養(yǎng)基(可放置于48℃±2℃恒溫裝置中保溫)傾注培養(yǎng)皿,并轉(zhuǎn)動(dòng)培養(yǎng)皿使其混合均勻",培養(yǎng)基的溫度要求從具體的點(diǎn)(46℃)擴(kuò)展到了一個(gè)范圍(46℃~50℃),這樣得出的結(jié)果除了人員操作造成的差異外,溫度的差異是不是也會(huì)造成檢測(cè)結(jié)果的不同呢?在實(shí)際工作中發(fā)現(xiàn),對(duì)于有些菌46℃傾注計(jì)數(shù)的結(jié)果和48℃傾注計(jì)數(shù)的結(jié)果的確有差異,那么如果再提高到50℃,這種差異是否會(huì)更加明顯?對(duì)于同一個(gè)樣品,當(dāng)不同的檢驗(yàn)人員分別用46℃和50℃的培養(yǎng)基傾注計(jì)數(shù),得出的數(shù)據(jù)不一致,甚至有爭(zhēng)議時(shí),該怎么辦?這也是筆者比較疑惑的地方。
3、試驗(yàn)操作
對(duì)于試驗(yàn)過(guò)程中的一些操作,新版標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行了更加細(xì)化的描述,比如6.1.3中,明確描述為稀釋液需要“在振蕩器上振蕩混勻,制成1∶100的樣品勻液",而不再沿用舊版本中“振搖試管或換用1支無(wú)菌吸管反復(fù)吹打使其混合均勻,制成1∶100的樣品勻液"的說(shuō)法。這一描述更加規(guī)范,也更加科學(xué),筆者非常認(rèn)同,不同方式的混勻程度,的確會(huì)給檢驗(yàn)結(jié)果帶來(lái)很大差異,具體請(qǐng)參考:微生物盲樣檢測(cè)介紹及注意事項(xiàng)
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