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卻普曼瓊脂培養(yǎng)基原理及現(xiàn)象

更新時(shí)間:2025-02-14   點(diǎn)擊次數(shù):498次

一、用途及原理

  該培養(yǎng)基用于金黃色葡萄球菌的檢測(cè)。

  蛋白胨、酵母浸粉提供細(xì)菌生長(zhǎng)所需的基本營(yíng)養(yǎng),磷酸氫二鉀為緩沖劑,甘露醇為可發(fā)酵碳源,較高濃度的氯化鈉可抑制不耐鹽細(xì)菌的生長(zhǎng),高濃度的硫酸銨可使明膠發(fā)生沉淀析出,培養(yǎng)基呈不透明狀。金黃色葡萄球菌可耐高滲環(huán)境,能在此培養(yǎng)基中生長(zhǎng),將不溶性大分子的明膠分解為小分子可溶性的氨基酸,菌落周?chē)呐囵B(yǎng)基變?yōu)橥该鳡睢=瘘S色葡萄球菌還可分解培養(yǎng)基中的甘露醇產(chǎn)酸,培養(yǎng)結(jié)束后,滴加酸堿指示劑可觀察產(chǎn)酸現(xiàn)象。


二、培養(yǎng)基配方(g/L)

蛋白胨

10.0

酵母浸出粉

2.5

磷酸氫二鉀

5.0

明膠

30.0

甘露醇

10.0

氯化鈉

55.0

硫酸銨

75.0

瓊脂

15.0

pH

7.2±0.2


三、配制方法

  稱(chēng)取本品202.5g,加熱溶解于1000ml蒸餾水中,分裝,121℃高壓滅菌15min,冷卻至45-50℃左右時(shí),傾入無(wú)菌平皿,備用。

  注:培養(yǎng)基中含有較多的明膠及硫酸銨,滅菌冷卻后應(yīng)搖勻立即在陰涼環(huán)境倒平板,使平板能夠快速凝固,制成的平板應(yīng)為均一渾濁不透明狀態(tài)。不可長(zhǎng)時(shí)間在50℃左右保溫,培養(yǎng)基易凝固;傾注平板前必須搖勻且能保證倒好的平板能快速凝固,若制成的平板呈透明狀態(tài),通常是因培養(yǎng)基未搖勻或凝固過(guò)慢導(dǎo)致的。


四、生長(zhǎng)現(xiàn)象及結(jié)果觀察

  接種以下質(zhì)控菌株,在36±1℃下培養(yǎng)18-24小時(shí):

質(zhì)控菌株

菌株編號(hào)

生長(zhǎng)情況

其他特征

金黃色葡萄球菌

ATCC25923

+++

菌落周?chē)型该鳝h(huán),產(chǎn)酸

表皮葡萄球菌

CMCC26069

+++

菌落周?chē)型该鳝h(huán),不產(chǎn)酸




表皮葡萄球菌
金黃色葡萄球菌


  發(fā)酵甘露醇產(chǎn)酸現(xiàn)象觀察:用棉簽除去平板上的菌落,在瓊脂表面滴加0.04%溴甲酚紫溶液,可同時(shí)在無(wú)菌落生長(zhǎng)的空白位置加1滴做為對(duì)照,若滴加的溴甲酚紫變黃,說(shuō)明該菌可發(fā)酵甘露醇產(chǎn)酸。





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